Técnica de Faust: fundamento y materiales, pasos, ventajas, desventajas
La técnica de Faust es una metodología que permite concentrar por flotación algunos huevos y/o larvas de parásitos contenidos en las heces. Es utilizada cuando los exámenes coproparasitológicos directos dan negativo o cuando se quieren obtener muestras limpias libres de detritus.
Los métodos de concentración para los exámenes coproparasitológicos son de tres tipos: por flotación, por sedimentación o por métodos que combinan los dos anteriores. Estos métodos aumentan las posibilidades de resultados positivos.
El método de Faust consiste en mezclar parte de la muestra de heces con una sustancia más densa que los huevos o parásitos que se quieren concentrar. Esto provoca que, al ser menos densos, floten en la superficie. El líquido sobrenadante se recoge y se observa al microscopio para la identificación y la cuantificación.
Este método se utiliza para visualizar huevos de helmintos. A su vez, ha demostrado ser un método muy sensible para el diagnóstico de Giardialamblia, un protozoo flagelado muy extendido a nivel mundial. Los métodos de flotación no se recomiendan para huevos de parásitos muy pesados como los de céstodos y tremátodos.
Las parasitosis son una de las infecciones intestinales más extendidas a nivel mundial, sobre todo en aquellos países pobres con medidas sanitarias deficientes. Por esta razón, disponer de métodos sensibles que permiten identificar y cuantificar estos parásitos es de gran utilidad para el diagnóstico y el tratamiento.
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La técnica se basa en la existencia de las diferentes gravedades específicas de los huevos, de los parásitos, de los quistes, de las larvas y de los detritus, utilizando soluciones de sulfato de zinc como método de flotación.
El fundamento de la técnica consiste en mezclar la muestra con una solución de sulfato de zinc que tiene una densidad mayor que la de los huevos, larvas o parásitos más livianos.
Esto permite el precipitado de los elementos más pesados y la flotación de los más livianos que aparecen en el sobrenadante después de la centrifugación de las muestras.
– Preparar una solución de sulfato de zinc con una densidad de 1,18 o de 1,2 g/ml si la muestra fue tratada previamente.
– Preparar una gradilla con tubos de ensayo previamente rotulados.
– Disponer de una máquina centrífuga.
– Tener a la mano láminas portaobjetos y cubreobjetos para el microscopio. Todos deben rotularse
– Asegurarse de la disposición de una solución de Lugol para teñir las láminas.
– Tener gasas para filtrar.
– Disponer de embudos y agua destilada.
– Ubicar envases de plástico o de cartón rotulados.
– También aplicadores y asa estéril de 5 mm.
– Un mechero para esterilizar el asa.
Para cualquier examen de heces se inicia el examen con lo que se llama el “examen macroscópico” de las muestras.
Se describe la consistencia, el color, la presencia de lo que aparente ser sangre, la presencia de moco y la presencia de parásitos adultos.
Luego se procede al “examen microscópico” de las heces, este depende del método. El más sencillo es el método de frotis directo, que es el método más simple de observación microscópica para parásitos.
El procedimiento consiste en colocar una pequeña cantidad de la muestra directamente en un portaobjetos. Colocar varias gotas de solución salina que deben tener un tamaño similar al de la muestra. Mezclar la solución salina con las heces hasta que se forme una mezcla homogénea. Colocar un cubreobjetos y examinar bajo el microscopio.
El segundo procedimiento consiste en el método de flotación de Faust, cuya versión original consiste en:
1- Colocar unos dos gramos de heces en un recipiente adecuado para tal fin.
2- Añadir 30 ml de solución de flotación de sulfato de zinc con la que se hace una emulsión mezclando la solución con las heces.
3- Colar con un colador de metal dentro de un segundo recipiente y transferir a un tubo de ensayo.
4- Añadir más solución de flotación hasta que se forme un menisco en el tubo.
5- Colocar un cubreobjetos de vidrio sobre el menisco. Se deja reposar de 10 a 15 minutos.
6- Retirar el cubreobjetos y colocarlo sobre una lámina portaobjetos, la cual se irá a examinar al microscopio.
Originalmente el método no utilizaba centrifugación, no obstante, en la actualidad se incluye ya que se obtienen mejores resultados. La técnica implica una serie de pasos para lograr un procedimiento adecuado, estos son como sigue:
1- Se lavan las heces con agua, se mezclan bien y luego se filtran con una gasa doblada en cuatro. Se coloca la muestra en un tubo de ensayo.
2- Se centrifuga y se elimina el sobrenadante (muestras que se mantienen por encima del agua). Se repiten los pasos 1 y 2 hasta que el sobrenadante esté “claro”.
3- Se agrega sulfato de zinc a la muestra filtrada y centrifugada.
4- Se mezcla bien.
5- Se centrifuga otra vez durante 1 minuto a 2500 rpm (revoluciones por minuto).
6- Se recupera el sobrenadante con un asa estéril de unos 5mm; no deben agitarse los tubos.
7- La muestra recuperada del sobrenadante se coloca en un portaobjetos y se puede colocar una gota de Lugol para colorear, se coloca el cubreobjetos y se observa al microscopio.
8- Se rotulan los envases y tubos de ensayo.
– Los elementos utilizados para el diagnóstico se pueden observar limpios y sin “detritus”, esto facilita la observación de la lámina y reduce el tiempo utilizado para el diagnóstico.
– En el sobrenadante se recobran tanto larvas, como huevos y/o quistes.
– Es un método de muy bajo costo.
– El procedimiento es muy sencillo y de fácil implementación.
– El diagnóstico es rápido y preciso.
– Debido a la importancia y gran incidencia de las parasitosis en los países pobres, estos métodos de bajo costo y de fácil ejecución son ideales para el diagnóstico y seguimiento de estas patologías.
La densidad de la solución de flotación produce una contracción de las larvas, es decir, estas se encogen y, en un periodo muy corto, puede deformarse. Esto obliga al examinador a hacer el diagnóstico de manera inmediata y no se pueden conservar las muestras tratadas para futuros exámenes.
Al igual que todos los métodos de identificación microscópica, se necesita de un personal examinador con mucha experiencia para lograr que los diagnósticos sean acertados.
La deformación rápida de los elementos necesarios para el diagnóstico, aunque son una desventaja evidente, se puede subsanar haciendo las observaciones microscópicas inmediatas.
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