Medio de cultivo enriquecido: características, tipos, usos
El medio de cultivo enriquecido consiste en la combinación de un agar nutritivo como base más una sustancia o compuesto enriquecido. Los medios enriquecidos por excelencia son el agar sangre y el agar chocolate.
Ambos medios se pueden preparar con una base simple de cualquier agar nutritivo, como por ejemplo agar nutriente, agar soya tripticaseína, o agar infusión cerebro corazón, entre otros. Igualmente, ambos medios son suplementados con un elemento muy enriquecido que es la sangre, con la diferencia de que en el primer caso se usa desfibrinada y en el segundo caso se usa calentada.
Estos medios no contienen inhibidores por lo que en ellos pueden crecer una gran variedad de microorganismos, incluyendo algunas cepas exigentes desde el punto de vista nutricional. En los que casos que ya son extremadamente exigentes requieren, además de sangre, otros aditivos especiales nutricionales, que deben ser añadidos al medio en el que se pretende aislar.
Por otra parte, si a un medio enriquecido se le agrega antibióticos u otra sustancia inhibidora, inmediatamente se convierte en un medio enriquecido selectivo. Estos últimos son necesarios cuando se pretende aislar microorganismos muy exigentes de una zona rica en microbiota, como por ejemplo Haemophilus sp y Neisseria meningitidis aislados de una muestra de exudado nasofaríngeo.
Índice del artículo
- 1 Características
- 2 Diferencias entre medios de cultivo y medios de enriquecimiento
- 3 Tipos de agar enriquecido y usos
- 4 Referencias
Estos medios poseen una base nutritiva compuesta por peptonas, extractos de levadura, digeridos pancreáticos y algunas veces glucosa, entre otros. También contiene sustancias que equilibran el pH, agua y agar-agar.
Por otra parte, se le puede agregar sangre desfibrinada o calentada y a su vez se pueden incluir factores de crecimiento específicos, tales como: complejos vitamínicos, biotina, ácido para –amino benzoico, hemina, NAD, entre otros.
Es importante destacar que los medios de cultivo enriquecidos no deben confundirse con los medios de enriquecimiento. Aunque ambos contienen nutrientes y requerimientos nutricionales especiales, los medios de enriquecimiento son líquidos y se usan como pre-tratamiento de muestras en donde se sospeche la presencia de un tipo de bacteria patógena que se encuentra en menor proporción dentro de una mezcla polimicrobiana.
El medio de enriquecimiento inhibirá a los microorganismos que no pertenezcan a ese grupo y favorecerá el crecimiento del patógeno.
Además, tienen la propiedad de reparar daños presentes sobre la estructura celular del microorganismo que se quiere recuperar, ya que normalmente puede estar afectado por tratamientos previos recibidos y en este sentido el medio actúa aumentando su viabilidad.
El agar enriquecido más usado es el agar sangre pero este puede ser preparado con diversas bases nutritivas y dependiendo de ello su utilidad cambia.
Por otra parte, también se encuentra el agar chocolate que es un medio enriquecido por excelencia. Sin embargo, al igual que el agar sangre se puede preparar con diversas bases nutritivas, además de incluir otros aditivos para el aislamiento de microorganismos exigentes.
A continuación se realizará un resumen de las bases de agar más usadas para preparar agar sangre y agar chocolate, así como también su utilidad en cada caso.
Preparado con:
Base de agar nutriente
Sirve para bacterias no exigentes, tales como: enterobacterias, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp, entre otros. No es adecuado para bacterias exigentes como los Streptococcus.
Base de agar infusión cerebro corazón
El agar sangre con esta base es excelente para la mayoría de las bacterias, incluyendo Streptococcus sp, pero no es recomendable para observar patrones de hemólisis. Esta combinación con ciertos aditivos es útil para determinados microorganismos. Ejemplos:
Si a este medio se le adiciona cistina y glucosa sirve para aislar Francisella tularensis. En tanto que, si se le añade cistina telurito es útil para aislar Corynebacterium diphteriae.
Así mismo, este medio sirve para aislar bacterias del género Haemophilus, pero en este caso es necesaria la adición de bacitracina, almidón de maíz, sangre de caballo y otros suplementos de enriquecimiento como el (IsoVitaleX).
Finalmente, si se incluye en su preparación (cloranfenicol – gentamicina) o (penicilina – estreptomicina) con sangre de caballo, es ideal para aislamiento de Histoplasma capsulatum.
Base de agar soya tripticaseína
Es excelente para favorecer el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, incluidos los Streptococcus sp, siendo el más recomendado para observar los patrones de hemólisis.
Si se suplementa con cistina telurito y sangre de cordero es ideal para Corynebacterium diphteriae.
Base de agar Müeller Hinton
Ideal para antibiogramas de microorganismos complicados como el Streptococcus sp, así como para aislamiento de Legionellapneumophila.
Base de agar Thayer Martin
Es ideal para aislar la especie Neisseria meningitidis.
Base de agar Columbia
Es especial para el aislamiento de Helicobacter pylori y Gardnerella vaginalis. Para mayor éxito se adicionan distintos tipos de antibióticos para inhibir la microbiota acompañante.
Base de agar Brucella
La combinación de sangre de cordero, vitamina K y agar Brucella es excelente para el cultivo de bacterias anaerobias.
Base de agar Campylobacter
Como su nombre lo indica, esta base sirve para aislar Campylobacter jejuni en muestras de heces. Para ello se suplementa con 5% de sangre de carnero y cefalotina, anfotericina B, trimetoprima, polimixina B y vancomicina.
Preparado con:
Base de agar Columbia
La preparación del agar chocolate con esta base es muy utilizada para aislar bacterias del género Neisseria.
También es recomendada para el aislamiento de Brucella sp, pero para ello se debe adicionar vitamina K y usar sangre de caballo.
Base de agar base GC
Es una de las bases recomendadas para hacer agar chocolate, especialmente para el aislamiento de gonococos.
Base de agar Müeller Hinton
Algunos microorganismos exigentes, como por ejemplo el Streptococcus pneumoniae, necesitan este medio para poder realizar la prueba de susceptibilidad antimicrobiana.
También es útil en el aislamiento de Neisserias y Haemophilus, con la salvedad que el género Haemophilus prefiere sangre de caballo, ya que es rica en factor X (hemina) y V (NAD).
En ocasiones es aconsejable incluir antibióticos en su preparación para inhibir la microbiota acompañante.
Base con agar Thayer Martin
Se recomienda el uso de sangre de cordero para preparar el agar chocolate con esta base. Este medio es especial para el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae. Se adicionan antibióticos para inhibir la microbiota acompañante.
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